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　　1、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析法

　　化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析又稱(chēng)化學(xué)發(fā)光免疫分析(CL IA),是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)有吖啶酯類(lèi)化合物——acridin ium ester(A E),是有效的發(fā)光標(biāo)記物[3],其通過(guò)起動(dòng)發(fā)光試劑(N aOH2H2O 2)作用而發(fā)光,強(qiáng)烈的直接發(fā)光在一秒鐘內(nèi)完成,為快速的閃爍發(fā)光(見(jiàn)圖1)。吖啶酯作為標(biāo)記物用于免疫分析,其化學(xué)反應(yīng)簡(jiǎn)單、快速、無(wú)須催化劑;檢測(cè)小分子抗原采用競(jìng)爭(zhēng)法,大分子抗原則采用夾心法,非特異性結(jié)合少,本底低;與大分子的結(jié)合不會(huì)減小所產(chǎn)生的光量,從而增加靈敏度。

　　2、發(fā)光酶免疫分析法

　　從標(biāo)記免疫分析角度,化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA),應(yīng)屬酶免疫分析,只是酶反應(yīng)的底物是發(fā)光劑,操作步驟與酶免分析完全相同[5]:以酶標(biāo)記生物活性物質(zhì)(如酶標(biāo)記的抗原或抗體)進(jìn)行免疫反應(yīng),免疫反應(yīng)復(fù)合物上的酶再作用于發(fā)光底物,在信號(hào)試劑作用下發(fā)光,用發(fā)光信號(hào)測(cè)定儀進(jìn)行發(fā)光測(cè)定。目前常用的標(biāo)記酶為辣根過(guò)氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(AL P),它們有各自的發(fā)光底物。