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斑點金免疫滲濾法原理
樣品處理與反應:
首先,將待測樣品(如血液、尿液等)滴加到特制的樣品墊上。
樣品中的目標抗原或抗體與樣品墊上預包被的金標抗體(或抗原)發(fā)生特異性結合反應,形成金標復合物。
通過毛細管作用,樣品在試紙條上滲濾移動,金標復合物也隨之移動。
固定與顯色:
當金標復合物移動到試紙條的檢測區(qū)時,檢測區(qū)預先包被有與目標分子特異性結合的抗體(或抗原)。
金標復合物與檢測區(qū)的抗體(或抗原)結合,形成“金標抗體-抗原-檢測區(qū)抗體”的夾心結構,從而固定在檢測區(qū)。
由于金標復合物的聚集,檢測區(qū)會出現(xiàn)可見的金斑點。金斑點的顏色深淺與樣品中目標分子的含量成正比關系。
光學檢測原理
光學成像:
金標斑點法定量讀數儀通過光學成像系統(tǒng)對試紙條上的金斑點進行掃描和成像。
成像系統(tǒng)通常包括光源、成像鏡頭和圖像傳感器(如CCD或CMOS)。
光源發(fā)出的光照射到試紙條上的金斑點,金斑點反射或散射光被成像鏡頭收集,并投射到圖像傳感器上。
圖像處理與定量分析:
圖像傳感器將接收到的光信號轉換為數字圖像信號。
讀數儀內置的圖像處理軟件對數字圖像進行分析,提取金斑點的特征信息,如顏色密度、面積等。
根據預先建立的標準曲線,將金斑點的特征信息轉換為目標分子的定量值。標準曲線是通過一系列已知濃度的標準品進行檢測,繪制金斑點特征與濃度的關系曲線。
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