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在滅菌程序驗證中，盡管可通過滅菌過程某些參數(shù)的監(jiān)控來評估滅菌效果，但生物指示劑的被滅殺程度，則是評價一個滅菌程序有效性最直觀的的指標?？墒褂檬惺鄣臉藴噬镏甘緞?，也可使用有日常生產(chǎn)污染菌監(jiān)控中分離的耐受性最強的微生物制備的孢子。在生物指示劑驗證試驗中，需確定孢子在實際滅菌條件下的D值，并測定孢子的純度和數(shù)量。驗證時，生物指示劑的微生物用量應比日常檢出的微生物污染量大，耐受性強，以保證滅菌程序有更大的安全性。在最終滅菌法中，生物指示劑應放在滅菌柜的不同部位。并避免指示劑直接接觸到被滅菌物品。生物指示劑按設定的條件滅菌后取出，分別置培養(yǎng)基中培養(yǎng)，確定生物指示劑中的孢子是否被完全殺滅。

過度殺滅產(chǎn)品滅菌驗證一般不考慮微生物污染水平，可采用市售的生物指示劑。對滅菌手段耐受性差的產(chǎn)品，設計滅菌程序時，根據(jù)經(jīng)驗預計在該生產(chǎn)工藝中產(chǎn)品微生物污染的水平，選擇生物指示劑的菌種和孢子書數(shù)量。這類產(chǎn)品的無菌保證應通過監(jiān)控每批滅菌前的微生物污染的數(shù)量、耐受性和滅菌程序驗證所獲得的數(shù)據(jù)進行評估。

在醫(yī)療機構(gòu)的滅菌生物監(jiān)測中，WS310國家標準已明確規(guī)定：

　　1、壓力蒸汽滅菌過程為每周一次，使用壓力蒸汽滅菌生物指示劑；

　　2、環(huán)氧乙烷氣體滅菌為每批次都要監(jiān)測，使用環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑；

　　3、低溫等離子體滅菌為每日監(jiān)測一次，使用低溫等離子體滅菌生物指示劑。

　　以上三種滅菌方式，。也是2012年醫(yī)療機構(gòu)的主要滅菌方式，其中，壓力蒸汽滅菌使用最為廣泛。